最新刊期
2021 年 第 11 期
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肿瘤相关巨噬细胞在骨肉瘤的研究进展
摘要：骨肉瘤（Osteosarcoma，OS）是儿童和青少年最常见的原发性骨肿瘤。它是一种侵袭性很强的恶性肿瘤。晚期伴有转移的OS患者尽管应用了化疗，但预后仍较差，因此探寻新的治疗靶点成为了OS的研究热点。OS细胞的肿瘤微环境（Tumor microenvironment，TME）被证实是支持肿瘤生长和扩散的必要条件。OS微环境的免疫成分主要由肿瘤相关巨噬细胞（Tumor-associated macrophages，TAMs）组成。在OS中，TAMs促进肿瘤生长和血管生成，并上调肿瘤干细胞样表型。本文通过深入分析TAMs已有的研究成果，指出目前的研究状态，并系统总结了TAMs在OS发生发展及治疗的进展情况，提出自己的观点。我们发现，TAMs在促进OS生长和血管生成以及上调OS干细胞样表型中发挥重要作用，但OS微环境如何影响TAMs表型以及TAMs与OS之间的相互作用机制还需要补充研究和进一步实验。关键词：肿瘤相关巨噬细胞;骨肉瘤;肿瘤微环境- 25
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发布时间：2021-11-17
Mini Review
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组织蛋白酶D沉默调节颗粒细胞的生物学行为并影响山羊的产仔性状
摘要：目的探究组织蛋白酶D（Cathepsin D，CTSD）对颗粒细胞生物学行为及山羊产羔性状的调控机制。创新点以中国贵州省优良地方品种黔北麻羊为对象，以CTSD为候选基因，以卵泡颗粒细胞为模型，首次探明了CTSD沉默对山羊颗粒细胞生物学行为的影响及其对山羊产羔性状的调控机理，对进一步挖掘、创新和利用中国山羊品种资源等方面具有重要意义。方法使用免疫组化法对CTSD在卵巢中进行定位分析；应用蛋白质印迹法（western blotting）技术探究CTSD在单、多羔山羊卵巢中的表达差异；使用细胞计数试剂（cell counting kit-8，CCK-8）技术检测CTSD沉默对细胞增殖的影响；使用流氏细胞仪检测CTSD沉默对颗粒细胞凋亡及周期的影响；使用定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术探究CTSD沉默对细胞增殖因子（增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA））、细胞凋亡标志基因（B细胞白血病/淋巴瘤2（B cell leukemia/lymphoma 2，Bcl-2）、Bcl-2相关X（Bcl-2-associated X，Bax）、半胱天冬酶3（caspase-3））、细胞周期蛋白（细胞周期蛋白A1（cyclin A1）、细胞周期蛋白D2（cyclin D2）、细胞周期蛋白E（cyclin E））及多胎性状候选基因（骨形态发生蛋白受体IB（bone morphogenetic protein receptor, type 1B，BMPR-IB）、促卵泡素受体（follicle stimulating hormone receptor，FSHR）、抑制素α（inhibin subunitα，INHA））表达的影响；使用western blotting检测CTSD敲低对多胎性状候选基因BMPR-IB、FSHR、INHA在翻译水平表达的影响。结论CTSD沉默可能通过一系列因素的表达水平（包括PCNA、Bcl-2、Bax、caspase-3、cyclin A1、cyclin D2和cyclin E）来调控颗粒细胞的增殖、凋亡和细胞周期进展，进而影响颗粒细胞的生物学功能。此外，CTSD可能通过调控多产性状的候选基因，包括BMPR-IB、FSHR和INHA来影响卵泡发育和排卵，从而间接影响山羊的产仔数。关键词：组织蛋白酶D（CTSD）;产羔性状;颗粒细胞;细胞凋亡;细胞周期;细胞增殖- 26
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发布时间：2021-11-17 -
红光促进小麦芽苗中叶酸积累
摘要：目的本研究旨在寻找刺激叶酸合成的最佳光谱和强度，并阐明红光调控小麦芽苗叶酸积累的机制。创新点在小麦芽苗生长过程中使用不同的光谱（白色、红色、蓝色、绿色和黄色）处理，发现了刺激叶酸合成的最佳光谱和强度，通过研究叶酸分布、叶酸生物合成中前体、酶和基因表达，进一步阐明了红光调控小麦芽苗叶酸积累的机制。方法小麦种子在25 °C下避光发芽2天后，第3天开始用30 µmol/(m2?s)的LED白光、红光（655 nm峰值）、蓝光（445 nm峰值）、绿光（520 nm峰值）和黄光（595 nm峰值）照射培养4天。光周期为16小时光照和8小时黑暗。在光照强度实验中，光照强度设置为0、15、30、45或60 µmol/(m2·s)。通过测定叶酸含量找出刺激叶酸合成的最佳光谱和强度。进一步研究最佳光照下小麦芽苗中叶酸分布、叶酸生物合成中前体、酶和基因表达。结论发芽和光处理增加了小麦芽苗叶酸的积累，30 µmol/(m2·s)红光照射下叶酸积累最多。红光促进小麦芽苗叶酸的积累主要表现在叶片中，尤其增加5-CH3-THF含量。此外，红光上调了叶酸合成相关基因表达，导致叶酸合成关键酶活性和前体含量的增加。关键词：小麦;红光;光照强度;叶酸积累- 17
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发布时间：2021-11-17 -
尿液供体来源的细胞游离DNA是BK病毒相关肾病的生物标志物
摘要：目的BK病毒相关肾病（BKPyVAN）是移植肾丢失的常见原因之一。然而，由于BKPyVAN和I型T细胞介导的排斥反应（TCMR）具有相似的病理表现，因此在猿猴空泡病毒40（SV40）染色阴性时，病理鉴别两者具有难度。创新点本文首次研究了供体来源的细胞游离DNA（ddcfDNA）能否区分BKPyVAN和I型TCMR。方法采用目标区域杂交捕获测序检测法，对12例肾功能稳定、22例I型TCMR、21例病理证实BKPyVAN和5例疑似PyVAN患者的ddcfDNA进行检测。结论在有移植物损伤时，患者尿液中ddcfDNA水平增加，而血浆中ddcfDNA无明显改变。病理证实BKPyVAN组尿液ddcfDNA的浓度和百分比的中位数均明显高于I型TCMR组（10.4 vs. 6.1 ng/mL，P<0.001；68.4% vs. 55.3%，P=0.013）。在单纯BKPyVAN亚组中，尿液ddcfDNA的百分比较BKPyVAN排斥样改变组升高明显（81.30% vs. 56.64%，P=0.025），而ddcfDNA的浓度则无明显升高。尿液ddcfDNA浓度7.81 ng/mL可作为区分病理证实BKPyVAN和I型TCMR的阈值（AUC=0.848，95%置信区间：0.734-0.963)。关键词：供体来源细胞游离DNA;BK病毒相关肾病;T细胞介导的排斥反应;尿液;鉴别诊断- 135
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发布时间：2021-11-17 -
掌叶防己碱通过抑制Akt/NF-κB信号通路的激活来缓解脂多糖诱导的急性肺损伤
摘要：目的探讨掌叶防己碱对脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤的作用及其潜在机制。创新点（1）利用分子生物学技术预测出掌叶防己碱与蛋白激酶B（Akt）的氨基酸残基苏氨酸（THR-51）之间存在氢键作用；（2）确证掌叶防己碱在LPS诱导的急性肺损伤中具有抗炎作用，有助于全面认识掌叶防己碱的生物学功能；（3）为临床缓解急性肺损伤提供潜在的有效药物，作为一种天然抗炎症药物在急性肺损伤临床的应用提供理论依据。方法采用蛋白质印迹法（western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测炎症基因和炎症蛋白在体内外的转录和翻译；使用免疫荧光法检测促炎转录因子核因子κB（NF-κB）P65转位进入细胞核程度；利用分子对接的方法模拟预测掌叶防己碱与Akt蛋白是否存在氢键作用。结论研究结果表明，掌叶防己碱预处理能显著抑制LPS诱导的体内外炎症细胞因子白细胞介素IL-1β的表达和分泌，显著降低促炎性蛋白酶诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白水平。机制研究结果进一步表明，掌叶防己碱能显著抑制LPS诱导的急性肺损伤模型和LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞（RAW264.7）细胞的Akt/NF-κB信号通路的激活。通过分子动力学模拟，我们观察到掌叶防己碱与Akt之间存在的氢键作用，有效地抑制了Akt的生物活性。综上所述，掌叶防己碱通过抑制Akt/NF-κB信号通路的激活有效地缓解了LPS诱导的急性肺损伤。关键词：急性肺损伤;掌叶防己碱;脂多糖（LPS）;蛋白激酶B/核因子κB（Akt/NF-κB）- 134
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发布时间：2021-11-17 -
血红素加氧酶-1/一氧化碳信号参与调控灵芝三萜积累的研究
摘要：目的通过外源性添加血红素加氧酶-1/一氧化碳（HO-1/CO）信号诱导剂及抑制剂，研究了其在灵芝三萜合成过程中的作用，并利用转录组初步探讨作用机制，以期为灵芝三萜代谢网络的深入研究提供参考。创新点HO-1/CO信号的研究多见于模式植物，在微生物中较少。本文主要研究了HO-1/CO信号在灵芝菌三萜积累过程中的作用，并初步证实HO-1/CO信号可参与调控三萜合成途径中关键酶基因的表达，同时可影响灵芝菌活性氧（ROS）和钙离子（Ca2+）信号的转导。方法本文首先利用HO-1/CO信号诱导剂及抑制剂处理液体发酵的灵芝菌丝，研究了HO-1/CO信号对三萜含量与HO-1酶活及基因表达的影响；其次，研究了HO-1/CO信号对三萜合成途径中关键酶基因（hmgr、sqs、ls）表达的影响；最后，利用转录组测序技术分析HO-1/CO信号介导下灵芝菌的差异表达基因，重点分析了ROS和Ca2+信号中关键基因的变化特征，并进行逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）验证。结论与未处理相比，血红素（hemin，10μmol/L）与外源性CO释放分子（CORM-2，10μmol/L）处理下三萜含量分别增加60.1%和56.0%；HO-1酶活分别增加57.1%和18.1%；而HO-1特异性抑制剂锌卟啉（ZnPPIX）则显著降低了三萜含量与HO-1酶活。上述各处理对三萜合成途径中关键酶基因（hmgr、sqs、ls）表达均造成不同程度的影响，初步证实HO-1及CO均参与介导三萜合成，且HO-1主要依靠其催化产物CO实现该调控作用。此外，转录组结果显示，HO-1/CO信号在参与介导三萜合成的过程中，还会影响ROS和Ca2+信号的表达。关键词：灵芝菌;三萜;血红素加氧酶-1/一氧化碳（HO-1/CO）信号;转录组测序- 63
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发布时间：2021-11-17
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