最新刊期
2019 年 第 9 期
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参与受氨基酸调控的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1信号通路的感受体的研究进展
摘要：概要哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)能够感受一系列细胞内外的环境因素(如氨基酸),从而控制细胞生长和代谢.在过去的几十年里,众多蛋白被发现能够参与受氨基酸调控的mTORC1信号通路中.Rag GTPases能够将氨基酸的信号传递给mTORC1并招募mTORC1到溶酶体表面.近年来,参与mTORC1信号通路的蛋氨酸代谢物、亮氨酸以及精氨酸的感受体逐渐被发现.感受体的鉴定有助于理解细胞是如何通过调整内部氨基酸感应通路来满足自身需求.本文综述了氨基酸调控mTORC1信号通路的分子机制,并探讨了感受体如何将特定氨基酸信号精确传递给mTORC1信号通路.关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1);氨基酸;感受体;溶酶体;Rag GTPases- 12
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发布时间：2022-01-05
review
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拟南芥NADPH氧化酶RBOHD羧基端倒数第三位氨基酸在其介导活性氧迸发中的重要作用
摘要：目的解析呼吸爆发氧化酶同系物蛋白D(RBOHD)介导活性氧迸发的分子机制.创新点首次研究RBOHD蛋白羧基端在植物体内活性氧迸发中的作用,并对其机制进行初步探究.方法本文利用正向遗传学方法筛选得到在多种病原物相关分子模式(PAMP)处理后活性氧不迸发的突变体delt.然后结合图位克隆和全基因测序技术,发现DELT1编码了RBOHD蛋白.DELT1-2在RBOHD羧基端倒数第三位谷氨酸位置发生了突变.深入分析发现,谷氨酸的突变不影响DELT1-2表达、蛋白定位和互作等功能,但会导致植物不响应PAMP诱导的气孔关闭.结论RBOHD羧基端倒数第三位谷氨酸对其功能发挥起着决定作用.关键词：活性氧;NADPH氧化酶;微生物相关分子模式;脂多糖;呼吸爆发氧化酶同系物蛋白D(RBOHD)- 32
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发布时间：2022-01-05 -
一株新的大口黑鲈弹状病毒(YH01)的分离、鉴定及其糖蛋白的杆状病毒表达系统的构建
摘要：目的探究大口黑鲈弹状病毒株与其他已知弹状病毒的差异,构建该病毒糖蛋白的杆状病毒表达系统,用于后续口服疫苗的研发.创新点基于获得的大口黑鲈弹状病毒的全基因组序列,并利用杆状病毒表达系统获得了高丰度的病毒糖蛋白,可结合家蚕用于后续口服疫苗的研发.方法利用cDNA末端快速扩增法(RACE)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等技术获得了病毒的部分序列,拼接获得了病毒的全基因组序列.通过ClustalW比较该病毒与已知弹状病毒的3’ leader及5’ trailer序列差异,进一步利用MEGA软件比较该病毒全基因组序列与其他鱼类弹状病毒的差异,确定其系统进化树中的分支及地位.基于糖蛋白序列分析结果,利用杆状病毒表达载体构建该病毒的糖蛋白表达系统,感染昆虫卵巢细胞(SF9)后,借助荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫荧光及蛋白质印迹法(western blot)等技术确定病毒增殖及糖蛋白的表达情况.结论该大口黑鲈弹状病毒株全长11 526 bp,且与鳜鱼弹状病毒为同一分支,属于水泡病毒属.构建的病毒糖蛋白杆状病毒表达系统成功在SF9细胞中表达了高丰度的糖蛋白.关键词：大口黑鲈;弹状病毒;糖蛋白;杆状病毒表达系统- 124
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发布时间：2022-01-05 -
禽腺病毒4型(FAdV-4)分离株对鸡的致病力及其基因组分析
摘要：目的了解禽腺病毒4型(FAdV-4)分离株在口服、滴鼻点眼和肌注三种感染途径下对7~35日龄鸡的致病性,并分析该分离株与其他参考毒株在基因组水平上的差异.创新点用原代鸡胚肾细胞(CEK)成功培养了FAdV-4分离株.发现除了常用的口服和肌注途径,FAdV-4也可通过滴鼻点眼接种途径感染7、21和35日龄鸡.肌注方法最为敏感,导致感染鸡100%死亡;35日龄鸡较7和21日龄鸡表现出更明显的临床症状和剖检病变.方法通过口服、滴鼻点眼和肌注三种途径将FAdV-4分离株的CEK细胞培养物接种7~35日龄的无特定病原体(SPF)鸡.通过临床症状观察、排毒检测、病理解剖、免疫组化和组织中毒载量测定来判断分离株的致病性及病毒在组织脏器中的分布情况.通过病毒中和试验检测感染存活鸡的血清中和抗体.通过全基因组测序分析,比较FAdV-4分离株与国内外参考毒株的基因组序列差异.结论本研究分离鉴定的FAdV-4分离株SD1511可以在CEK细胞上适应,并可以通过口服、滴鼻点眼和肌注三种感染途径引起7~35日龄的SPF鸡50%~100%的死亡,其中肌注最为敏感,死亡率达100%.感染鸡持续排毒至感染后的40天,产生具有明显中和作用的中和抗体.全基因组测序分析结果显示,SD1511基因组与最近国内分离的FAdV-4具有很高的同源性,但与国外的分离株有明显的差异.关键词：禽腺病毒4型(FAdV-4)分离株;致病性;感染途径;中和活性;基因组测序分析- 20
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发布时间：2022-01-05 -
假肥大型肌营养不良症(DMD/BMD)遗传学诊断及剪接突变的致病性分析
摘要：目的针对100例无亲缘关系的假肥大型肌营养不良症(DMD/BMD)患者,联合应用多种检测技术进行遗传学诊断,并且建立个体化产前诊断及胚胎植入前遗传学诊断方案,以最大限度地降低DMD/BMD患儿的出生.创新点通过minigene剪接实验分析DMD:c.1149+1G>A和c.1150−2A>G突变是否导致剪接异常,并确定剪接方式.方法收集100例无亲缘关系DMD/BMD患者的临床资料,应用多重连接依赖式探针扩增技术(MLPA)、第二代测序(NGS)、minigene剪接实验(HMSA)进行遗传学诊断,并通过单体型分析及性别鉴定进行胚胎植入前遗传学诊断.结论联合应用多种检测技术可以尽早地对患者进行遗传学诊断,为临床遗传咨询和产前诊断及胚胎植入前遗传学诊断提供了科学依据.关键词：DMD基因;突变;遗传学诊断;剪接突变;Minigene剪接实验- 15
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发布时间：2022-01-05 -
中国汉族特发性扩张型心肌病患者
LDB3 基因多态性与临床表现及植入型心律转复除颤器(ICD)植入的相关性研究摘要：目的探讨LDB3(LIM domain binding 3)基因多态性与中国汉族特发性扩张型心肌病发病的相关性,并分析LDB3基因多态性对患者临床表现和植入型心律转复除颤器(ICD)植入的影响.创新点首次明确LDB3基因多态性与中国汉族特发性扩张型心肌病发病密切相关,发现了三个与脑钠肽、舒张压、左室射血分数相关的多态性位点和一个与植入心律转复除颤器相关的多态性位点.方法本研究纳入我院159例中国汉族特发性扩张型心肌病患者和247例无亲缘关系健康对照并收集基线临床资料.提取外周血DNA后,聚合酶链式反应扩增LDB3基因的14个外显子,经Sanger一代测序,获得基因突变位点.通过关联分析,研究基因多态性与特发性扩张型心肌病发病之间的相关性.根据连锁不平衡系数和基因分布频率进行单倍体分析,研究不同单倍体分型对特发性扩张型心肌病发病的影响.结论在LDB3基因多态性分析中,发现9个多态性位点符合哈代-温伯格平衡.其中rs4468255位点多态性与中国汉族特发性扩张型心肌病发病密切相关.rs11812601、rs56165849和rs3740346位点多态性与患者舒张压、左室射血分数存在显著关联(P<0.05).且携带rs4468255多态性的患者更倾向于安装植入型心律转复除颤器.关键词：特发性扩张型心肌病;植入型心律转复除颤器;LDB3;基因多态性;中国汉族- 22
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发布时间：2022-01-05
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喉癌患者癌组织与癌旁正常组织之间蛋白磷酸酶2A及其相关分子标志物表达水平的比较研究
摘要：目的探讨喉癌患者组织样本中蛋白磷酸酶2A及其相关蛋白在癌组织与癌旁组织之间的表达差异,建立可用于临床进行喉癌患者预后分层的多指标预测体系.创新点以蛋白磷酸酶2A为核心,探讨系列肿瘤转移相关指标参与喉癌发生发展的分子机制.方法收集2012~2015年间浙江大学医学院附属第二医院耳鼻咽喉科28例喉鳞状细胞癌患者的临床组织样本,提取总蛋白后进行免疫印迹分析.结论与癌旁正常组织相比,喉癌组织中phospho-PP2A/C(Y307)、α4、CIP2A、Akt、ezrin、phospho-ezrin(T567)、14-3-3以及FAK蛋白水平均显著升高,而phospho-Akt(T308)蛋白水平则显著降低.关键词：喉癌;蛋白磷酸酶2A;生物标志物- 16
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发布时间：2022-01-05
Correspondence
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